Tema 11.1-Hemostasia Primaria Coagulacion y Fibrinolisis

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Tema 11.1

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Tema 11.1 HEMOSTASIA PRIMARIA, COAGULACIN SANGUNEA Y FIBRINLISISBioqumica Clnica i Hematologia Bioqu ClBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07 Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

Tema 11.1

Tema 11.1

Capacidad hemosttica del organismo est formada por la cooperacin de tres mecanismos ampliamente relacionadosCoagulacin sangunia

El proceso trombtico-hemosttico actan tres sistemas en paralelo que son la agregacin plaquetar la coagulacin la fibrinolisis y que presentan numerosas interconexiones entre si

Hemostasia primaria

Actividad fibrinoltica

Alrededor de desequilibrios entre estos sistemas se configuran dos grandes sndromes: el sndrome hemorrgico el sndrome tromboemblico

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HEMOSTASIA PRIMARIAOrigen, morfologa y estructura de las plaquetas Fisiologa de la hemostasia primaria

Tema 11.1

Tema 11.1

HEMOSTASIA PRIMARIA

COAGULACIN SANGUNEAFisiologa de la coagulacin. Definicin Factores de la coagulacin Esquema clsico de la coagulacin Definicin va intrnseca y va extrnseca Iniciacin de coagulacin Sistema de contacto Factor tisular Progresin del estmulo coagulativo: generacin de trombina Fibrinoformacin : generacin de fibrina Inhibidores de la coagulacin

Origen, morfologa y estructura de las plaquetas Fisiologa primaria de la hemostasia

FIBRINOLISISFisiologa de la fibrinolisisBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07 Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

Origen, morfologia y estructura de las plaquetas

Tema 11.1

Origen de las plaquetas

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OrigenPrecursor diploide (2 N) agranulado (ya contiene: GP IIb, VWF, FP4) Poliploidizacin por endomitosis: megacarioblasto hasta 8 N, megacariocito hasta 64 N Desarrollo de granulacin: Grnulos (azurfilos) Grnulos densos (microscopa electrnica) Demarcacin de membranas Liberacin de 1.000 a 5.000 plaquetasBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07 Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

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Tema 11.1

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SERIE MEGACARIOCTICAmegacarioblasto Megacariocito granular

Morfologa de las plaquetaspromegacarioblasto Megacariociito maduro Megacariocito maduro liberador de de plaquetas liberador plaquetas Megacariociito maduro

Dimetro: 2-4 m Forma discoidal Color rojizo Nmero variable de grnulos 20-25 cada campo en objetivo inmersin (x1000)Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07 Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

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Estructura de las plaquetas - 1MEMBRANABicapa fosfolipdica: Soporte para los factores de la coagulacin Glicoprotenas de membrana: Funciones de adhesin y agregacin (Ib, IIbIIIa, IaIIa, etc,)

CITOESQUELETOMicrotbulos Protenas contrctiles: Cambio de forma, reaccin de liberacin

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GPIa-IIa

GPIb GPIIIb-IIIa

Gp Ib

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Fox 2001

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Tema 11.1

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Glicoprotenas de la membranaGLICOPROTENAS RECEPTORES FUNCIN

Estructura de las plaquetas - 2

GRNULOSGrnulos densos: Nucletidos (ADP), Ca++ Grnulos : Protenas (factor plaquetario 4, factor von Willebrand)

GP Ibsialoglicoprotena

FvW Trombina Colgeno Fibringeno FvW

Adhesin Adhesin AgregacinBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

SISTEMAS MEMBRANOSOSSistema canalicular abierto Sistema tubular denso: depsito de Ca++ necesario para la activacin plaquetaria

Gp Ia-IIaintegrina

GP IIb-IIIaintegrina

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Sistema tubular denso

Grnulo denso

Mitocndria

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IIIa IIbIV

VI

P Selectina

Fisiologa de la hemostasia primaria

IIIa

IIbIIb IIIa

II c

Adhesin plaquetaria al subendotelio Activacin de las vas metablicas: liberacin del contenido de los grnulos y densos (ADP)

IIa

Ia IX V IbIb

Microtbulos

Agregacin plaquetaria Formacin del tapn hemostticoBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

Receptor de siete dominios transmembrana

Grnulo Sistema canalicular abierto

Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07 Dibujo esquemtico de la plaqueta y sus principales componentes

Tema 11.1

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Fisiologa de la hemostasia primaria

Adhesin plaquetaria

GP Iblesin endotelial. lesi

VWF

FvW subendotelial expone

que

se

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Activacin plaquetaria

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Activacin plaquetaria: formacin de pseudpodos

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Esquema de los procesos de adhesin, activacn y agregacin plaquetar

Adhesin

Tema 11.1 Adhesin al monocito

Agregacin plaquetariaP Selectina GP IIbIIIa inactiva

Actividad procoagulanteFibringeno

Fibrina Monocito

D

IIa Complejo Protrombinasa GP IaIIa PSGL-1

GP Ib IX/V

F vW Matriz subendotelial

FP4 ADP Serotonina

GP IIbIIIa activa

Activacin Secrecin AgregacinColgenoBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

Matriz subendotelial

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h ho

o h

- +

o

h h o

+ +

oh o h

+

COAGULACIN SANGUNEA Fisiologa de la coagulacin. Definicin Factores de la coagulacin Esquema clsico de la coagulacin Definicin va intrnseca y va extrnseca Iniciacin de coagulacin Sistema de contacto Factor tisular Progresin del estmulo coagulativo: generacin de trombina Fibrinoformacin : generacin de fibrina Inhibidores de la coagulacinBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

A

+

B

Fibringeno

F.von Willebrand

+

+ +

- +

-

A: Endotelio conservado B: Tapn hemostticoBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

Fisiologa de la coagulacin. Definicin

-

+

+

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Factores de la coagulacin - 1

SERINPROTEASASDefinicin La coagulacin es el proceso enzimtico en cadena que finaliza en la transformacin de las molculas de fibringeno, solubles en plasma, en una malla de fibrina insoluble. Del sistema de contactoPrecalicreina* (PK) Factor XII* Factor XI*

Vitamina K dependientesFactor IX* Factor X* Factor VII* Factor II (protrombina)*

* Factores sintetizados por los hepatocitosBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07 Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

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Esquema clsico de la coagulacionXIIK QAPM XIIa XI XIa IXa VIIIa Ca2+ IX

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Factores de la coagulacin - 2 COFACTORES NO ENZIMTICOSDel sistema de contactoQuiningeno de alto peso molecular* (QAPM)

TFVIIa Ca2+ VII

De la coagulacin fisiolgicaFactor VIII* Factor V* **XaXa Va Ca2+ II PL Fibringeno

PL

X

SUSTRATO FINALFibringeno*

IIa

ESTABILIZACIN DE LA FIBRINAFactor XIII* * Factores sintetizados por los hepatocitos, **factor sintetizado por los megacariocitosBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

fibrina

cogulo

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Tema 11.1

ESQUEMA CLSICO DE LA COAGULACIONTema 11.1

Definiciones clsicas de va intrnseca y extrnseca Va extrnsecaDefinicin

Va intrnseca PK.XII HMWK XI IX XIa IXa VIII X Xa V II Fibringeno

Va extrnseca VIIa FT VII

Capacidad de generar trombina que posea la adicin de extracto de cerebro animal (tromboplastina tisular) sobre una muestra de plasma Va intrnsecaDefinicin

Va comn IIa FibrinaBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

Sangre que era capaz de coagularse en un tubo de cristal sin necesidad de aditivos exgenos, por el simple contacto de la sangre con el cristal del tubo de ensayo y daba como resultado la formacin de trombinaBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

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Mecanismo de activacin de Precalicreina (PK) y factor XII sobre la clula endotelial

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Iniciacin de la coagulacin -I Sistema de contactoPK QAPM XII

BK BK

Iniciacin de la coagulacin -II Factor tisularKQAPMa XIIa

PK XII QAPM

KQAPMa

XII

QAPMa

K XIIa

BK

BK

es el responsable del inicio de la coagulacin cuando introducimos plasma en un tubo de cristal Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07 ESCASO PAPEL IN VIVO

A nivel fisiolgico la iniciacin de la coagulacin se debe fundamentalmen a la aparicin sobre diversas superficies celulares de una glicoprotena transmembrana llamada factor tisular ( FT) En situacin basal no se expresa Tejidos ricos: capa adventicia de los vasos sanguneos o las meninges Lesin en pared vascular: se exponen clulas a la sangre que expresan factor tisular constitucionalmente. Cuando el FT contacta con el factor VIIa circulante (1-2% del FVII esta en su forma activa a nivel basal) se inicia la transformacin de los factores IX y X circulantes en IXa y XaBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

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Iniciacin de la coagulacin -II Factor tisular1.

Progresin del estmulo coagulativo Generacin de trombina

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una serie de reacciones enzimticas en cadena propagan el proceso coagulativo hasta la formacin de trombina, molcula clave en el proceso trombtico por sus mltiples acciones las diversas reacciones que propagan el estmulo trombtico desde su iniciacin hasta la generacin de trombina comparten una serie de caractersticas comunes un zimgeno, glicoprotena circulante, es transformado en enzima mediante un mecanismo proteoltico y gracias a la accin de otro enzima la reaccin es posible por el ensamblaje del enzima y el zimgeno sobre una superficie fosfolipdica con cargas negativas a la que se unen a travs de puentes de Ca++ la presencia de un cofactor (factores VIIIa y Va o factor tisular) incrementa enormemente la actividad cataltica del enzima sobre el sustrato (x 105- 106 veces) la superficie de anclaje para los factores vitamino-K dependientes (VII,IX,X,II (protombina)) es aportada mayoritariamente por las plaquetas activadas y su unin depende de la integridad del dominio Gla Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07 de estos factores

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Factores vitamina k dependientesse sintetizan por el hepatocito sufren modificacin post-traslacional antes de ser liberados: - carboxilacin del cido glutmico se forman residuos - carboxiglutmicos de las regiones Gla: para ello precisa de la donacin de radicales CO2 por parte del ciclo de oxidacinreduccin de la vitamina K

Tema 11.1

ESQUEMA CLSICO DE LA COAGULACION

Tema 11.1

Va intrnseca PK.XII HMWK XI IX XIa IXa VIII X Xa V II IIa

Va extrnseca VIIa FT VII

FT FT

VIIa

IX X

Puentes de calcio entre factores dependientes y la membrana celular

Progresin del estmulo coagulativo Generacin de trombina (IIa)FT VIIa IX X Xa IXa VIIIa IXa X

Xa Va Xa

Complejos enzimticos involucrados en la generacin de trombina

YYYYYY YYY vitamina KBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

Va comn

Fibringeno

FibrinaBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

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Tema 11.1 Cascada de la coagulacin y principales mecanismos de amplificacin IX

XIIK QAPM

XIIa XI XIa

TFIXa VIIIa Ca2+ VIIa Ca2+ VII

XaXa Va Ca2+ II protrombinasa PL

Xa

PL

X

II

IIa

Fibringeno

fibrina

cogulo

IIaBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07 Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

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Acciones de la trombinaComplejo XasaVIIIa VIII

Fibrinoformacin Generacin de fibrina

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Activacin y reclutamiento plaquetar Inhibicin fibrinolisisTAFI TM TAFI a

Complejo PTasaVa V

IIa AmplificacinXIa XI

Inhibicin coagulacinPC TM PCa

Polimerizacin fibrinaXIIIa XIII

Liberacin de tPA

Fbgno

FP AiB

Fbna

tPABioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

La trombina acta sobre el fibringeno plasmtico para transformarlo en fibrina Son liberados los fibrinopptidos A y B por la accin proteoltica de la trombina Se forma monmeros de fibrina que tras redistribucin de cargas elctricas se forman polmeros poco estables Una transglutaminasa, el factor XIII, tras ser activado por la trombina cataliza, en presencia de calcio, la formacin de enlaces covalentes entre cadenas y , consiguiendo una fibrina estabilizada Esta fibrina estabilizada es ms resistente a la accin ltica de la plasmina Recordar que el fibringeno tambin interviene en el proceso de agregacin plaquetaria a travs de la formacin de puentes entre receptores glicoproteicos IIbIIIa de dos plaquetas.Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

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Tema 11.1I S I S I

Va intrnseca PK.XII HMWK XI IX XIa IXa VIII X Xa V II Fibringeno

Va factor Xa

Va extrnseca VIIa FT VII

Activacin trombina

de

la

F1+2 PTI S I S I

protrombina

I S I S I

trombinaAccin de la trombina sobre el fibringeno

Fp A i B Va comn IIa FibrinaBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

monmero de fibrina

fibringenoBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

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Estabilizacin de la fibrina por el F. XIII

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Tema 11.1

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Inhibidores de la coagulacin AntitrombinaInhibe serinproteasas (IIa, Xa, IXa) Su accin es potenciada por la heparina

Protena CSerinproteasa vitamina K dependiente Inhibe a los factores V y VIII

Protena SVitamina K dependiente (no es un enzima) Cofactor de la protena C

TrombomodulinaHaemostasis: generation of thrombin and clot formationBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

Receptor endotelial Activador de la protena CBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

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Inhibidores de la coagulacinXIIK HMWK XIIa XI PS PC PCa XIa IXa IX

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Inhibidores de la coagulacin: sistema PC/ PS/TM PC T

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TFVIIa Ca2+ VII

Va T PC TMREPC

Vi

VIIIaTM Ca2+

XaXa

PL

X

VaCa2+ II PL Fibringeno IIa

ATIII

TFPI

PCa PS

Va

Fibrina

coguloBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07 Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

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IIa

AT

IIa

AT

FIBRINOLISISIIa AT

Fisiologa de la fibrinolisisHeparn sulfato

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Componentes del sistema fibrinoltico ActivadoresActivador tisular del plasmingeno (t-PA) Uroquinasa (u-PA)

Fisiologa de la fibrinolisis Plasmingeno scu-PA /Ru-PA (PgnO) PAI PAI t-PA Plasmina (Pna) TAFI IP u-PA/Ru-PA

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Contacto

SustratoPlasmingeno

InhibidoresPAI-1 y PAI-2 (inhibidores del activador del plasmingeno) 2- Antiplasmina (IP) TAFI ( inhibidor de la fibrinolisis activable por la trombina)Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

Fibrina

PDFna

Pro-MPMs ITMP

MPMs

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Degradacin MEC

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Fibrinlisis fisiolgicaLa capacidad del t-Pa de activar el plasmingeno (PgnO) est muy favorecida (x102 veces) por el ensamblaje de ambos a la fibrina

Km=65Mt-PA Pgno t-PA Pna

Km=0.16Mt-PA Pgno Fibrina t-PA

Pna Fibrina

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Fibrinlisis sistmica

FASE PLASMTICA VIII

V

Fgno

Degradacin inespecficaPgno Pna0,1 segundos

IP

PA

PAI

Muy enlentecido

Pgno

IP PnaPDFna

SUPERFICIE FIBRINA

Fibrina

PDFna PDFna

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Protelisis del fibringeno y de la fibrina

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Protelisis del fibringenoD E D D E D D E D D E D

Frag.E

EFrag.Y

DFrag.D

B 15-42

D E

D DOligmeros X

E D

D

DFrag.X

E E

DB 1-42

D

D

A carboxiterm.

D

E

D

D E

D

Dmero D

D

D

Fibringeno

Degradacin

FibrinaBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07 Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

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Tema 11.1

Protelisis de la fibrina estabilizada

CoagulacinII

FibrinolisisPgno

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IIa

Pna

Fbgno

Fbna

PDFs

PCa

TM IIa

TAFIa

PCBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

TAFIBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07

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