Fijadores Simples y Mezclas

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    03-Jul-2015

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Mecanismo de Accin

FIJADORES SIMPLES

Caractersticas

Datos Tcnicos

Ventajas

DesventajasFuerte reductor, incompatible con fijadores oxidantes como el dicromato de K y tetrxido de osmio. No fija adecuadamente la cromatina. Disuelve ac. nucleico y extrae parcialmente los lpidos. Endurece y contrae excesivamente los tejidos. Pierde su actividad al ir interactuando con el agua. Carece de efecto mordiente (qumicamente es un reductor, prepara mal la tincin). Origina fenmeno de desplazamiento de sustancias. Provocan una gran contraccin tisular y por tanto grandes artefactos. Fija muy rpido y endurece demasiado a los tejidos. La rpida extraccin del agua desde el tejido provoca una contraccin nuclear, que deja un halo perinuclear epitelios). Tiempo fijacin muy controlado.

Alcohol Etlico (CH3CH2OH)No Aditivo Coagulante

Preserva GLUCOGENO y la actividad de ciertas enzimas (fosfatasa, alcalina y acidas) Fija pigmentos Uso en extensiones citolgicas (PAP, lquidos como la sangre y secreciones). Buen fijador para IHQ (Altera escasamente las estructura antignica).

Liquido Inflamable, muy voltil y olor agradable. Preparacin: tomar 70-90 ml de OH y llevar hasta 100 ml de agua destilada. Tamao corte : 5 mm Tiempo fijacin : 2-4 hrs Renovacin :3 veces

Fija y deshidrata al mismo tiempo. Gran velocidad de penetracin Precipita muy rpido las protenas y el glucgeno (fijacin rpida). Agente bactericida (buen conservante).

Deshidrata cin celular

Acetona (CH3-COCH3)No Aditivo Coagulante

Agente no aditivo y muy oxidante (su tomo de oxgeno puede compartir un par de electrones). Uso limitado: IQ y IHQ Preserva muy exactamente la estructura antignica y la actividad enzimtica de estos. Deshidrata violentamente. Miscible en agua e incompatible con fijadores metlicos bivalentes. Generalmente se la emplea sola.

Liquido Inflamable, muy voltil y olor dulzon. Preparacin: Se usa sin diluir a 4C Tiempo fijacin: 2hrs. Mximo. *Piezas delgadas se recomienda 20 min.

Conserva bien estructuras antignicas y la actividad enzimtica. Rrecomendada para cidos nucleicos y en IFD (deteccin de complejos autoinmunes: biopsia renal, heptica, piel o mucosa). Uso en determinados estudios con MET. Disuelve los lpidos y los carbohidratos se conservan (correcta precipitacin de las protenas).

Mecanismo de Accin

FIJADORES SIMPLES

Caractersticas

Datos Tcnicos

VentajasFijador ideal de nucleoprotenas y ac. Nucleicos. Penetra rpidamente y deja el tejido muy blando

Desventajas

Fijador ideal para NCLEO, PROTENAS Y ACIDO NUCLEICOS.

Liquido transparente, de fuerte olor

Es mal fijador de

MEZCLAS FIJADORAS

PREPARACIONSOLUCIN ACUOSA DE C. PCRICO (C. PCRICO AL 1-2% EN AGUA DESTILADA) 750.0 ml FORMALINA CONCENTRADA 250.0 ml. C. ACTICO GLACIAL... ...50.0 ml. PH. FINAL... 2.2 TIEMPO DE FIJACIN.. 2 a 24 horas

USOPiel rganos endocrinos Testculo Tejido embrionario Hgado ganglio embargo no es recomendado para la fijacin de biopsias renales sobre los cuales provoca una severa distorsin Es

ACCIONuno de los mejores fijadores para el estudio del glucgeno; penetra rpidamente a los tejidos.

Bouin

Es

*Sin

un buen fijador general, salvo para el rin (provoca distorsin). La expansin de volumen provocada por el cido actico es contrastado por la retraccin del cido pcrico. La

tincin amarilla producida por el cido pcrico se retira con la aplicacin de Alcohol 70%, sino causa deterioro en la coloracin. muy adecuado para las coloraciones de Masson y Mallory.

Es

Produce poco encogimiento. El lquido completo es una solucin Este

estable.

fijador produce lisis de los glbulos rojos y disminuye la cantidad de hierro frrico demostrable. - Los tejidos no deben permanecer por ms de 12 a 24 h. pues sino se vuelven duros y quebradizos. Una vez terminada la fijacin se debe pasar directamente a la deshidratacin con alcohol 80.

Bouin Hollander

ACETATO NEUTRO DE COBRE.. 2.5 gr. C. PCRICO.. ...4.0 gr. FORMALINA CONCENTRADA.. ....10.0 ml. C. ACTICO GLACIAL.... .1.5 ml. AGUA DESTILADA..100.0 ml. Para preparar la solucin se disuelve primero la sal de cobre en el agua destilada luego se aade el cido pcrico y tras filtrarlos el formol y el cido actico glacial. Esta solucin se conserva indefinidamente a temperatura ambiente el tiempo de fijacin oscila entre 48-72 horas.

Es una variante del liquido de Bouin, indicado para la fijacin de los cilindros de biopsia de mdula sea cuando no es posible controlar el tiempo de fijacin de la muestra en ste lquido, la conservacin, puede incluso conservar las 48 horas sin que se produzca excesivo endurecimiento.

Medula sea

Bouin alcohlico

ALCOHOL ETILICO 80%........................75.0 ml. C. PCRICO.. 0.5 gr. FORMALINA CONCENTRADA. ...30.0 ml. C. ACTICO GLACIAL.. .7.5 ml.

Glucogeno Hgado Ganglios Piel

Es una alternativa de lquido de Bouin, se usa para fijaciones relativamente voluminosa porque posee una velocidad de penetracin mucho mas elevada.

Mezclar antes de usar el tiempo medio de fijacin para fragmentos con un espesor en torno a 5 milmetros es de 2 a 3 horas.

ZENKER

Solucin stock de Zenker: CLORURO MERCRICO5gr. DICROMATO POTSICO. ..2.5 gr. SULFATO SDICO 1 gr. AGUA DESTILADA C.S.P. .. ..100.0 ml. El cido actico reacciona con el dicromato y hace que la solucin se oscurezca progresivamente, por lo que debe recomponerse antes de su uso.

Bazo Medula sea

Trata de combinar los efectos favorables del sublimado y del dicromato potsico. En la prctica habitual ha sido sustituido por B5.

Su empleo ha quedado prcticamente restringido al proceso de refinacindescalcificacin a que son sometidas las biopsias de mdula sea cuando se realiza una fijacin inicial con B5.

El tiempo de fijacin puede ser mas prolongada que con la solucin de b5 porque el cido actico que contiene, produce un excesivo endurecimiento. Pero no se deben sobreasar las 48 horas.

Tras la fijacin el material debe ser tratado con sulfato sdico al 5% durante 1-2 horas.

El bicloruro de mercurio es una sustancia que corroe el instrumental metlico. Es un fijador adecuado para las muestras a las que se les aplique IHQ.

Antes de emplear las tinciones es necesario eliminar de los tejidos, los pigmentos precipitados del bicloruro de mercurio

B5

Rin

CLORURO MERCRICO 12.0 gr. ACETATO SDICO.....2.5 gr. AGUA DESTILADA.....200 ml. Solucin es inestable ya que formaldehdo reduce el sublimado. Aparicin de precipitados mercricos sobre los tejidos antes de ser coloreados. Se someten a un tratamiento especfico mediante soluciones que eliminan estos depsitos.

Espesor

mximo de las muestras no mas 4 mm (escaso poder de penetracin de la mezcla). tiempo de fijacin no debe superar las 4 horas. la fijacin los tejidos se pueden conservar indefinidamente en alcohol etlico al 70-80. mayor utilidad de estos fijadores es que mejoran considerablemente la tincin nuclear, de hecho la fijacin en una mezcla que contenga sublimado es hoy da prcticamente imprescindible para el diagnstico morfolgico en las patologas del sistema linfoide y hematopoytico. Es debido a la gran importancia que se da a la observacin de finos detalles nucleares como es la presencia o no de hendiduras o repliegues nucleares y del nucleolo para catalogar un tumor maligno de ganglios linfticos, o de mdula sea (leucemias) como de alto o bajo grado de malignidad y

El

Tras

La

por tanto recomendar la teraputica ms oportuna. Adems

estas soluciones B5, zenker formol son los fijadores de eleccin para el rin, hgado, fibras de tejido conectivo y para fibrina. Se prefiere la solucin de B5 porque al no contener dicromato, esto permite una mejor conservacin de la cromatina nuclear y de la estructura antignica tisular

CARNOY

ETANOL ABOSLUTO....60.0 ml. CLOROFORMO.30.0 ml. C. ACTICO GLACIAL..10.0 ml. El tiempo de fijacin puede ser acortado hasta 3 horas. Las muestras deben cambiarse directamente a alcohol etlico absoluto. El mayor endurecimiento se produce al prolongar demasiado la deshidratacin en alcohol, para prevenirlo se puede sustituir el etanol por metanol en la composicin de lquido fijador y para conservar la pieza se deposita en alcohol etlico absoluto.

Glucogeno Hidratos de carbono Protenas fibrilares Miofibrillas Hgado

Este fijador es muy adecuado para pequeos fragmentos tisulares, por Ej. obtenidos por raspado, que se fijan bien en 30 min. a 2 h.

Su accin fijadora es extremadamente rpida deshidratando el tejido al mismo tiempo, sin embargo produce una excesiva retraccin mstica y una hemlisis masiva de eritrocitos as como una pobre conservacin estructural del ADN.

Tambin inicia la deshidratacin, es un buen fijador para el glucgeno, los ncleos se tien bien.

Como inconvenientes podemos citar que produce lisis y encogimiento importante.

Disuelve los lpidos y la mielina.

Es un fijador que posee un excelente poder de penetracin y de difusin.

Las muestras delgadas de tejidos y rganos se fijan en dos o tres horas.

Produce lisis de los eritrocitos. Es el fijador adecuado cuando se desea demostrar glucgeno y la tincin de ncleos y especialmente cromosomas.

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