10 Ascencios Prueba Rapida

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    16-Jan-2016

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GRIESS

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  • METODO GRIESS PARA LA METODO GRIESS PARA LA DETECCION DE TB MDRDETECCION DE TB MDR

    LabLab. Nac. de Referencia de . Nac. de Referencia de MicobacteriasMicobacterias

    CNSP/INSCNSP/INS

    LUIS ASENCIOS S.

  • RETOS PARA EL LABORATORIO

    Desarrollar una prueba simple, precisa, rDesarrollar una prueba simple, precisa, rpida, pida, de bajo costo y que puede ser desarrollada en de bajo costo y que puede ser desarrollada en el nivel de atenciel nivel de atencin primaria y que produzcan n primaria y que produzcan resultados rresultados rpidos en el mismo dpidos en el mismo da.a.

    Simplificar el Simplificar el DxDx de TB, incluyendo los BK(de TB, incluyendo los BK(--) y ) y TB extrapulmonar con el diseTB extrapulmonar con el diseo de una prueba o de una prueba de mayor Sensibilidad y de mayor Sensibilidad y EspecificiadadEspecificiadad y tenga y tenga majormajor accesibilidad.accesibilidad.

  • RETOS PARA EL LABORATORIO

    Prueba para realizar monitoreo del tratamientoPrueba para realizar monitoreo del tratamiento

    Prueba para identificar rPrueba para identificar rpidamente la pidamente la resistencia a drogas de 1ra y 2da lresistencia a drogas de 1ra y 2da lneanea

    Prueba para Prueba para DxDx. infecci. infeccin latente y determinar a n latente y determinar a la progresila progresin a la enfermedad activa.n a la enfermedad activa.

  • OMS :Global Plan VIOMS :Global Plan VI

    Para fin de 2015, se espera que los Para fin de 2015, se espera que los paisespaisesrealicen realicen PSPS al 20% de los casos nuevos al 20% de los casos nuevos con riesgo de TB MDR y en 100% de los con riesgo de TB MDR y en 100% de los casos con antecedentes de tratamiento.casos con antecedentes de tratamiento.

  • Tuberculosis Tuberculosis multidrogomultidrogo--resistente resistente (TB MDR(TB MDR))

    La OMS, define la TB MDR como resistencia simultLa OMS, define la TB MDR como resistencia simultnea nea por lo menos, por lo menos, isoniacidaisoniacida y rifampicina (ny rifampicina (ncleo del cleo del tratamiento de la TB primaria).tratamiento de la TB primaria).

    La TB MDR es una forma emergente de la enfermedad La TB MDR es una forma emergente de la enfermedad que es mque es ms difs difcil de tratar y curarcil de tratar y curar

    El tratamiento es mEl tratamiento es ms largo (aproximadamente 18 a 24 s largo (aproximadamente 18 a 24 meses)meses)

    El tratamiento es con medicamentos de 2da El tratamiento es con medicamentos de 2da LineaLinea..

  • Pruebas RPruebas Rpidaspidas

    Son Pruebas que detectan la resistencia a Son Pruebas que detectan la resistencia a isoniacidaisoniacida y rifampicina de 1 a 4 semanas. y rifampicina de 1 a 4 semanas.

    Son pruebas directas se realizan a partir de Son pruebas directas se realizan a partir de muestras de esputo, sin necesidad del muestras de esputo, sin necesidad del aislamiento de la bacteria por cultivo. aislamiento de la bacteria por cultivo.

    De esta forma, las pruebas rDe esta forma, las pruebas rpidas, facilitan pidas, facilitan la eleccila eleccin de un esquema adecuado de n de un esquema adecuado de tratamiento al diagnosticar o descartar la TB tratamiento al diagnosticar o descartar la TB MDR en forma precozMDR en forma precoz

  • El mtodo Griess se basa en la determinacin de la actividad enzimtica de la bacteria M. tuberculosis, que en cultivos de crecimiento activo reduce el nitrato a nitrito que es detectada al incorporar el reactivo de Griessdando como resultado una reaccin colorimtrica.

    MetodoMetodo GriessGriess--FundamentoFundamento

  • Brindar un tcnica sencilla, confiable, rpida y econmico que permita examinar un gran nmero de muestras a fin de seleccionar a aquellos pacientes que pudieran estar potencialmente infectados con cepas M. tuberculosis resistente o multirresistente(MDR).

    Objetivo.-

  • Captacin SR (PS, CS, Hospital)

    1. Nunca Tratado

    2. Antes Tratado (Recadas, abandonos recuperados )

    FluxogramaDel P.S /C.S. al Lab. DISA que procesa Prueba Rpida.

    Laboratorio implementado con prueba Griess

    INS PS 1ra y 2 da Linea

    BK(+)

    Laboratorio

    C.S.

    Llenar Solicitud de Investigacin Bacteriolgica

    Solicitud

    MDR

    NetLab

  • GestiGestin en Enfermern en EnfermeraaDetecciDeteccin del Sintomn del Sintomtico Respiratoriotico Respiratorio

    Examinar al sintomtico respiratorio identificado y capacitar para la recoleccin de la muestra.

  • GestiGestin en Enfermern en EnfermeraaDetecciDeteccin del Sintomn del Sintomtico Respiratoriotico Respiratorio

    Es la actividad de salud

    pblica orientada a

    identificar precozmente

    a las personas que

    contagian la

    tuberculosis.

  • LABORATORIOLABORATORIO

  • DIGESTIONDIGESTION-- DESCONTAMINACION E DESCONTAMINACION E INOCULACION A MEDIOSINOCULACION A MEDIOS

  • -Para cada muestra, preparar un set de 5 tubos de medio L-J

    3 tubos control de crecimiento 1 tubo con RIF1 tubo con INH2 tubos L-J para otras pruebasIncubar a 37 C (leer a los 14, 21 y 28 das,

    segn sea necesario) (Ej. Si el control no es positivo a los 14 das, leer a los 21 das, etc.)

    Siembra de la Muestra

  • INTERPRETACION DE INTERPRETACION DE RESULTADOSRESULTADOS

  • 1. Se considera que un aislamiento es sensible a la droga, si al comparar el tubo control con los tubos que contienen droga no se observa ningn cambio de color o el cambio es muy leve.

    2. Un aislamiento se considera resistente, si hay cambio de color en el tubo que contiene la droga igual o mayor al del tubo control.

  • Continuacin

    3. La prueba no se considerarvlida, si no hay ningn cambio de color en el tubo control. Estas muestras se debern cultivar por mtodos de la rutina.

  • C INH SM EMB RMP

    Cepa M. tuberculosis H37Rv, sensible a las cuatro drogas estudiadas.

    C INH RMP

    Cepa M. tuberculosis resistente a INH y sensible al resto de las drogas.

    C INH RMP

    Cepa M. tuberculosisresistente a INH - RMP .

  • Solicitud de Prueba de Sensibilidad en pacientes con sospecha de TB MDR segn normas de la Estrategia

    de Control de Tuberculosis

    GRIESSPacientes ,Baciloscopas positivas (+, ++ o +++)

    MDRRIF= Resistente

    INH=Resistente

    RIF= Sensible

    INH= Sensible

    RIF= Resistente

    INH= Sensible

    RIF= Sensible

    INH=Resistente

    Enviar cepa al INS para PS 1ra y 2da.

    Lnea. El resultado al EE

    SS

    Enviar el resultado al

    EE SS

    Enviar cepa al INS para PS 1ra y 2da. Lnea y resultado al

    EE SS

    Enviar cepa al INS para PS 1ra a y 2da. Lnea y resultado al

    EE SS

  • RIFAMPICINA: S= 100% E=100%

    ISONIACIDA: S=97% E=96%

    RIFAMPICINA: S= 100% E=100%ISONIACIDA: S=93% E=100%

  • RIFAMPICINA: S= 94% E=100% VPP = 100% VPN= 92%

    ISONIACIDA: S=99.1% E=100% VPP= 100% VPN=98%

  • Ventajas del MVentajas del Mtodo todo GriessGriess sobre otras sobre otras pruebas rpruebas rpidaspidas

    Simplicidad de la tSimplicidad de la tcnicacnica Bajo costo (2 dBajo costo (2 dlares)lares) Bioseguridad Bioseguridad Equipos convencionalesEquipos convencionales Tiempo de obtenciTiempo de obtencin del resultado de 2 a n del resultado de 2 a

    4 semanas4 semanas

  • Desventajas de Desventajas de GriessGriess

    Se requieren muestras de esputo positivos.

    No se puede calcular con precisin la concentracin de las UFC.

    Como es una muestra directa puede estar sujeta a contaminacin.

  • MUCHAS GRACIAS

    e-mail: luisasencioss@yahoo.es